湖州市的路费补贴可以通过网上申请和线下办理两种方式进行。

网上申请需要登录湖州市交通局的官网，填写相关个人信息和行驶路线，上传相关证明材料，审核通过后即可获得补贴。线下办理则需要前往所在街道或乡镇的交通管理部门，携带相关证明材料进行申请。领取补贴时需要提供车辆及行驶证明，且只能领一次，具体金额和条件以当地政策为准。