主要考你基本的pcr实验操作,比如说试剂的配置。
Pcr仪的基本操作程序设置。以及遇到问题如何解决。
1. 试剂准备阶段试剂准备是PCR操作的第一个流程，需要在试剂贮存和准备区的超净工作台或生物安全柜进行，用确保无污染的移液器、枪头及容器等进行分装。所有的PCR体系都应该在-20℃保存，除了ddH2O之外，其余的试剂组份需完全融化之后再加入，以免影响浓度。配制反应体系应在快速进行，以减少非特异性扩增。体系配制完成之后应马上进行PCR反应。
2. 样本制备阶段样本制备是整个PCR反应中最为关键的环节，在接收样本时一定要确保样本的密封性以及样本编号的唯一性。严格遵守操作规程进行加样操作，操作时候尽量少说话或者不说话。所有操作需要在生物安全柜内进行，操作前后生物安全柜需要进行紫外灯消毒，注意生物安全柜中物品的排放。戴手套并勤于更换，要有「无核酸观念」。
3. 核酸扩增在核酸扩增环节需要选择质量好的Ep管，装入反应体系的EP管上机前混匀、离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部。在样本检测的同时设立对照（阳性对照、阴性对照、阴性模板、试剂对照）。同时严密检测PCR扩增仪的各项性能指标，其中对PCR扩增仪而言温度控制就意味着质量。
