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vp实验原理及方法

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一、实验原理:某些细菌分解葡萄糖生成丙酮酸,丙酮酸可进一步脱羧生成乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在碱性环境下被氧化成为二乙酰,后者与蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用,生成红色的胍缩二乙酰而呈现红色,为VP试验阳性。

若培养基中胍基含量少,可加入少量含胍基的化合物如肌酸肌酐等(本试验加入α萘酚)可以加速其反应。

二、试剂与器材:

1、菌种:大肠埃希氏菌、产气肠杆菌。

2、培养基:葡萄糖蛋白胨水。

3、试剂:VP试液甲液(6%α萘酚酒精溶液)和乙液(40%KOH溶液)三、操作步骤:Barritt法:将大肠埃希氏菌和产气肠杆菌分别接种于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培养24h~48h,于培养物中先加入VP试液甲液(6%α萘酚酒精溶液)6滴,摇匀,再加入乙液(40%KOH溶液)2滴,摇匀,观察结果。

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